2026-04-09
이 애플리케이션 노트는 사료 첨가제에서 구아니디노아세트산 및 관련 불순물의 정량을 위해 Wayeal 이온 크로마토그래피 시스템의 사용을 설명합니다. 사료 첨가제의 주요 기능은 미량 수준의 보충을 통해 사료 성능을 향상시키고 가축 생산 효율을 높이는 것입니다.
사료 첨가제의 구성은 안전성, 효능 및 규정 준수를 보장하기 위해 매우 엄격하게 관리됩니다. 제품 지침 및 동물 영양 요구 사항에 기반한 정확한 비율로 확립된 표준에 따라 엄격하게 첨가해야 합니다. 과도한 첨가는 독성을 유발할 수 있으며, 불충분한 첨가는 효과가 없게 만듭니다. 모든 물질의 불법 첨가는 엄격히 금지됩니다.
사료 및 사료 첨가물 관리 규정에 따라 호르몬, 승인되지 않은 화학 물질 및 수의학 약품 원료의 직접 첨가는 엄격히 금지됩니다. 사료의 품질 관리는 원료 및 완제품 모두에 대한 테스트를 통해 보장됩니다. 정확한 함량 결정은 기업에 기술 데이터 지원을 제공합니다.
키워드: 이온 크로마토그래피, UV 검출기, 사료 첨가제.
1. 기기 및 시약
1.1 이온 크로마토그래프 구성 목록
표 1 기기 구성 목록
|
번호. |
모듈식 |
수량 |
|---|---|---|
| 1 | UV 검출기가 있는 IC6200 시리즈 이온 크로마토그래피 시스템 | 1 |
| 2 | AS3100 자동 시료 채취기 | 1 |
| 3 | SmartLab CDS 2.0 크로마토그래피 워크스테이션 | 1 |
| 4 | MS-5C-P2, 4.6×250 mm | 1 |
1.2 시약 및 표준
표 2 시약 및 표준 목록
|
번호. |
시약 / 표준 |
순도 |
|---|---|---|
| 1 | 구아니디노아세트산 (GAA) 액체 표준 | 507.03 mg/L |
| 2 | 시아나미드 액체 표준 | 1081.29 mg/L |
| 3 | 디시안디아미드 액체 표준 | 1107.72 mg/L |
| 4 | 글리신 액체 표준 | 1344.10 mg/L |
1.3 실험 재료 및 보조 장비
사전 충전된 주사기 필터, 친수성, 0.45μm
주사기 (20mL)
2. 실험 방법
2.1 시료 전처리
건조된 시료 0.2g을 250mL 비커에 정확히 칭량합니다. 초순수 100mL를 첨가하고 비커를 초음파 수조에 30분 동안 넣습니다. 이 추출 절차를 3~4회 반복합니다. 결합된 추출액을 정량적으로 1000mL 부피 플라스크로 옮기고 초순수로 표선까지 희석한 후 철저히 혼합합니다. 준비된 시료 용액은 희석하지 않은 상태와 10배 희석한 상태 모두에서 사용됩니다. 각 용액의 적절한 부분을 0.22μm 멤브레인 필터로 여과한 후 기기에 주입하여 분석합니다.
2.2 실험 조건
표 3 크로마토그래피 조건
| 크로마토그래피 컬럼 | MS-5C-P2, 4.6 × 250 mm |
| 용리액 | 8–35 mM MSA 기울기 용리 |
| 유속 | 1mL/min |
| 실행 시간 | 60분 |
| 주입 부피 | 10μL |
| 컬럼 온도 | 40 °C |
| 셀 온도 | 45 °C |
| 파장 | 200nm |
3. 실험 결과
3.1 표준 크로마토그램
분석은 60분 이내에 완료되며, 우수한 선형성과 뛰어난 선형 반복성을 보여줍니다. 검출 한계 (LOD) 및 정량 한계 (LOQ)는 우수하며, 시료 반복성은 만족스러워 테스트 요구 사항을 충족합니다.
![]()
그림 1 보정 표준의 오버레이된 크로마토그램
3.2 선형 범위
표준 용액의 적절한 부피를 취하고 희석하여 보정 곡선을 작성했습니다. 선형성 테스트 결과와 알려진 농도 간의 편차는 최대 허용 편차 내에 있었습니다. 모든 분석 대상 물질에 대해 상관 계수 (R)는 0.999 이상으로, 뛰어난 선형성을 나타냅니다.
표 4 각 분석 대상 물질의 선형 범위
|
분석 대상 물질 |
선형 범위 |
상관 계수 (R) |
|---|---|---|
| 구아니디노아세트산 | 10–100mg/L | 0.99994 |
| 시아나미드 | 2.5–80mg/L | 0.99996 |
| 디시안디아미드 | 0.1–1mg/L | 0.99919 |
| 글리신 | 5–100mg/L | 1.00000 |
![]()
그림 2 각 분석 대상 물질의 선형성 결과
3.3 선형 반복성 테스트
![]()
그림 3 반복성 테스트를 위한 가장 낮은 보정 표준 (S1)의 8회 연속 주입의 오버레이된 크로마토그램.
![]()
그림 4 반복성 테스트를 위한 중간 지점 보정 표준 (S3)의 8회 연속 주입의 오버레이된 크로마토그램
![]()
그림 5 반복성 테스트를 위한 가장 높은 보정 표준 (S7)의 8회 연속 주입의 오버레이된 크로마토그램
표 5 보정 곡선 반복성 테스트 데이터
|
화합물 |
보정 지점 |
유지 시간 (분) RSD (%) |
피크 면적 (μS*s) RSD (%) |
|---|---|---|---|
| 구아니디노아세트산 | S1 | 0.282 | 0.28 |
| S3 | 0.22 | 0.754 | |
| S6 | 0.284 | 0.28 | |
| 시아나미드 | S1 | 0.268 | 0.143 |
| S3 | 0.257 | 0.046 | |
| S6 | 0.352 | 0.118 | |
| 디시안디아미드 | S1 | 0.811 | 0.396 |
| S3 | 0.706 | 0.043 | |
| S6 | 0.906 | 0.027 | |
| 글리신 | S1 | 0.221 | 0.263 |
| S3 | 0.171 | 0.101 | |
| S6 | 0.232 | 0.035 |
3.4 검출 한계 (LOD) 테스트
![]()
그림 6 구아니디노아세트산의 검출 한계 테스트 크로마토그램
표 6 구아니디노아세트산의 검출 한계 (LOD) 및 정량 한계 (LOQ) 테스트 데이터
|
화합물 |
농도 (mg/L) |
신호 대 잡음비 (S/N) |
피크 높이 (μS) |
잡음 (μS) |
이론적 LOD (mg/L) |
이론적 LOQ (mg/L) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 구아니디노아세트산 | 0.01 | 34.844 | 0.124 | 0.007 | 0.001 | 0.003 |
3.5 불순물에 대한 LOD 및 LOQ 테스트
![]()
그림 7 불순물에 대한 LOD 및 LOQ 테스트
표 7 불순물에 대한 LOD 및 LOQ 테스트 데이터
|
화합물 |
농도 (mg/L) |
신호 대 잡음비 |
피크 높이 (μS) |
잡음 (μS) |
이론적 LOD (mg/L) |
이론적 LOQ (mg/L) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 시아나미드 | 0.25 | 20.436 | 0.057 | 0.006 | 0.037 | 0.122 |
| 디시안디아미드 | 0.05 | 74.434 | 0.206 | 0.006 | 0.002 | 0.007 |
| 글리신 | 2 | 27.124 | 0.075 | 0.006 | 0.221 | 0.737 |
3.6 시료 함량 및 반복성 테스트 크로마토그램
![]()
그림 8 희석되지 않은 사료 첨가제 시료의 8회 연속 주입 크로마토그램
표 8 희석되지 않은 사료 첨가제 시료 테스트 데이터
|
시료 이름 |
분석 대상 물질 |
시료 무게 (g) |
최종 부피 (mL) |
결과 (mg/L) |
함량 (g/kg) |
유지 시간 RSD (%) |
피크 면적 (μS·s) RSD (%) |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 사료 첨가제 | 시아나미드 | 0.2 | 1000 | 검출되지 않음 | 검출되지 않음 | / | / |
| 디시안디아미드 | 0.2 | 1000 | 0.099 | 0.495 | 0.397 | 0.44 | |
| 글리신 | 0.2 | 1000 | 검출되지 않음 | 검출되지 않음 | / | / |
![]()
그림 9 10배 희석된 사료 첨가제 시료의 8회 연속 주입 크로마토그램
표 9 10배 희석된 사료 첨가제 시료 테스트 데이터
|
시료 이름 |
분석 대상 물질 |
시료 무게 (g) |
최종 부피 (mL) |
희석 계수 |
결과 (mg/L) |
함량 (g/kg) |
유지 시간 RSD (%) |
피크 면적 (μS·s) RSD (%) |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 10배 희석된 사료 첨가제 시료 | 구아니디노아세트산 | 0.2 | 1000 | 10 | 18.61 | 930.5 | 0.083 | 0.637 |
4. 결론
본 연구에서는 Wayeal 이온 크로마토그래피 시스템을 사용하여 사료 첨가제에서 구아니디노아세트산 및 관련 불순물의 함량을 정량했습니다. 이 방법은 사료 첨가제에서 목표 분석 대상 물질을 정확하게 정량할 수 있으며, 사료 및 사료 첨가물 관리 규정을 준수하는지 여부를 확인할 수 있습니다. 분석 대상 물질 함량에 대한 정확한 제어를 제공함으로써 이 방법은 기업에 기술 데이터 지원을 제공합니다.
문의사항을 직접 저희에게 보내세요