고성능 액체 염색체 검사를 통해 사료에서 메티오닌 수소산성 아날로그를 결정

메티오닌 수산화 아날로그 (MHA) 는 식품 산업에서 메티오닌을 대체하기 위해 널리 사용되는 유기산 첨가물이다.돼지 (돼지 새끼와 마감 돼지), 상식축물 (유축축 및 육류축물) 및 수산물 (어류 및 새우). 메티오닌의 대체물로서 사료 비용을 줄이는 데 중요한 효과를 나타냅니다.동물의 장내 환경을 개선, 동물의 면역력을 강화합니다.

자외선 검출과 결합한 고성능 액체 염색체는 뛰어난 분리 효율으로 인해 다양한 복잡한 사료 샘플 분석에 적합합니다.강한 매트릭스 간섭 저항성, 높은 탐지 민감성, 안정적이고 신뢰할 수있는 수치 결과.이 실험은 "고성능 액체 염색체 촬영을 통해 사료에서 메티오닌 수산화 아날로그의 결정" 표준 (GB/T 19371-2025) 에 따라 수행되었습니다.. A Wayeal LC3400 series high performance liquid chromatograph equipped with a UV detector was employed to validate the sample pretreatment procedure and the liquid chromatographic separation and detection system, 다양한 유형의 사료 표본에서 메티오닌 수산화 아날로그의 질적 검출과 정확한 정량 분석을 가능하게합니다.

키워드: 사료; 메티오닌 하이드록시 아날로그; 고성능 액체 염색체.

1기기 및 반응제

1.1 HPLC 구성 목록

표 1 고성능 액체 염색체 시스템 구성 목록

1.2 반응제 및 기준 표준 목록

표 2 반응기 및 기준 표준 목록

1.3 액체 염색체 촬영 조건

표 3 고성능 액체 염색체 촬영 조건

1.4 실험자재와 보조장비

초음파 청소기

포르텍스 믹서;

고속 원심분리기

분석 균형

쉐이커

2실험 방법

2.1 용액 준비

2.1.1 표준 곡선 솔루션:

적절한 양의 메티오닌 하이드록시 아날로그 기준을 정확하게 무게하고 10% 아세토니트릴에 용해하여 질량 농도 0의 일련의 표준 용액을 준비합니다.5, 1.0, 2.05.0, 10.020년040년0, 그리고 80.0μg/mL. 각 표준 용액의 5mL를 15mL 막힌 시험관으로 각각 정확하게 옮기십시오. 50% 칼륨 하이드록시드 용액의 0.1mL을 정확하게 첨가하고 15초 동안 소용돌이를하십시오.0을 정확하게 더하면.2mL의 50%의 인산화산 용액, 또 다른 15초 동안 소용돌이. 8000r/min에서 5분 동안 원심분리. 분석 전에 초연구물을 미세포로스막 필터로 통과시켜라.

2.1.2 시험 샘플 용액:

피드 샘플의 5g를 용기에 무게를 두고, 10% 아세토니트릴 용액의 50mL를 첨가하고, 30초 동안 섞습니다. 쉐이커에 넣어 30분 동안 흔들고, 8000r/min에서 5분 동안 원심분리합니다.그리고 나중에 사용 하기 위해 초상태 물질을 유지 합니다. 위의 수퍼나넌트의 5mL를 15mL 막힌 시험관으로 정확하게 옮기십시오. 50% 칼륨 하이드록시드 용액과 소용돌이를 0.1mL로 정확하게 15 세 동안 첨가하십시오. 그 다음 0.2mL의 50% 엽소산 용액과 더 많은 15s를 위해 소용돌이분당 8000r에서 5분 동안 원심화합니다. 분석하기 전에 초상태 물질을 미세모막 필터로 통과시켜 두 개의 평행 시험 샘플 용액을 준비합니다.

2.1.3 복원 테스트 솔루션:

표본 초식물질의 2.5mL와 각 표준시리즈 용액의 2.5mL를 15mL의 막힌 시험관으로 정확하게 옮깁니다.50% 칼륨 하이드록시드 용액 1mL 및 15초 동안 소용돌이. 다음 정확하게 0.2mL 50% 인화산 용액을 첨가하고 또 다른 15 세 동안 소용돌이. 5 분 동안 8000r / min에서 원심분기.분석하기 전에 초상태 물질을 마이크로 포러스 막 필터로 통과시킵니다..

3실험 결과

3.1 선형성과 범위

표 4 표준 곡선 농도 표

그림 1 메티오닌 하이드록시 아날로그의 표준 곡선

참고: 메티오닌 하이드록시 아날로그의 기준 표준 용액의 적절한 양을 채취하여 표준 곡선을 준비하기 위해 일련의 농도로 희석했습니다.선형 범위는 0.5∙80.0μg/mL, 그리고 상관 계수 (R) 는 0이었습니다.99983, 분석 물질의 우수한 선형성을 나타냅니다.

3.2 정확성

그림 2 참조 표준 (20,0μg/mL) 의 정밀 테스트의 덮여있는 염색체

표 5 참조 표준 (20,0μg/mL) 의 정밀 시험 데이터

참고: 메티오닌 하이드록시 아날로그의 기준 표준 (20의 농도에서)0μ6번 연속 주입되었습니다. 유지 시간의 반복성 (RSD) 은 0.084%, 피크 영역의 반복성 (RSD) 은 0.391%로 좋은 기기 정밀도를 나타냅니다.

3.3 회수

그림 3 사료에서 메티오닌 하이드록시 아날로그에 대한 회복 테스트의 덮여있는 염색체

표 6 피드 내 메티오닌 하이드록시 아날로그에 대한 복원 테스트 데이터

참고: 표본은 40의 농도로 기준 표준으로 첨가되었습니다.0μg/mL로 분석하여 위에서 설명한 절차에 따라 분석되었습니다.

3.4 탐지 한계 (LOD)

그림 4 메티온 하이드록시 아날로그 표준의 크로마토그램 (2.5μg/mL)

표 7 메티오닌 하이드록시 아날로그 참조 표준의 테스트 데이터 (2.5μg/mL)

참고: 위의 표에서 보이는 2.5μg/mL의 메티오닌 하이드록시 아날로그의 기준 표준의 시험 데이터에 기초하여, 이론적 검출 한계 (LOD) 는 0으로 계산되었습니다.033μg/mL 신호/음소 비율 3 (S/N = 3).

3.5 사료 샘플의 검사

그림 5 사료 샘플의 염색체

참고: 메티오닌 하이드록시 아날로그는 0의 농도로 사료 샘플에서 검출되었습니다.402μg/mL

4결론

이 실험은 표준 "고성능 액체 염색체 촬영을 통해 사료에서 메티오닌 수산화 아날로그의 결정" (GB/T 19371-2025) 에 따라 수행되었습니다.UV 검출기로 장착된 Wayeal LC3400 시리즈 고성능 액체 염색기실험 결과는 목표 피크가 좋은 대칭과 높은 이론 판 수를 나타냈다는 것을 보여주었습니다.5∙80.0μg/mL, 상관 계수 (R) 는 0보다 높았습니다.9998MHA 참조 표준의 보유 시간 및 피크 영역의 RSD 값 (20.0μ그/ml) 는 각각 0.084% 및 0.391%로 우수한 기기 정밀도를 나타냅니다.0μg/mL는 88.56%로 좋은 방법의 정확성을 보여줍니다. MHA에 대한 이론적 검출 한계 (LOD) 는 0으로 결정되었습니다.033μMHA는 0의 농도로 사료 샘플에서 성공적으로 검출되었습니다.402μ위 모든 데이터는 기기 성능에 대한 약국 방법의 요구 사항을 충족합니다.