2025-11-04
뉴클레오티드로서, Uridine 5'-monophosphate (UMP)는 생명체 내 핵산 대사의 핵심 중간체입니다. 이는 포유류의 모유에서 가장 풍부한 뉴클레오티드이며, 유리딜레이트의 식이 요구량은 자손의 성장과 발달 동안 다른 뉴클레오티드보다 훨씬 높습니다. 최근 연구에 따르면 UMP는 에너지 대사 및 RNA 합성에 참여할 뿐만 아니라 세포 신호 전달 경로를 조절하여 장벽 기능을 향상시킵니다. 또한 지용성 비타민과 시너지 효과를 발휘하여 영양 흡수와 면역 기능을 촉진합니다. UMP는 유아용 조제분유 및 가축/가금류 사료에 영양 강화제로 흔히 첨가되며, 순도와 농도는 최종 제품의 영양 가치와 안전성에 직접적인 영향을 미칩니다.
키워드:식품 영양 강화제, UMP, 뉴클레오티드, 고성능 액체 크로마토그래피.
1. 기기 및 시약
1.1 HPLC 구성 목록
표 1 HPLC 구성 목록
| No. | 모듈 | 수량 |
| 1 | LC3200 고성능 액체 크로마토그래피 | 1 |
| 2 | P3210B 이중 고압 펌프 | 1 |
| 3 | CT3400 컬럼 오븐 | 1 |
| 4 | AS3210 자동 시료 주입기 | 1 |
| 5 | UV3210 UV 검출기 | 1 |
| 6 | SmartLab CDS 2.0 워크스테이션 | 1 |
| 7 | Nova Element AQC18 5μm 4.6*250mm | 1 |
1.2 시약 및 표준 물질
표 2 시약 및 표준 물질 목록
| No. | 시약 및 표준 물질 | 순도 |
| 1 | 5'-monophosphate | 96.2% |
| 2 | Uridine | 98% |
| 3 | Uracil | 98% |
1.3 실험 재료 및 보조 장비
초음파 세척기
볼텍스 믹서
2. 실험 방법 및 조건
크로마토그래피 컬럼: Nova Element AQC18, 5μm 4.6x250mm.
3. 실험 결과
3.1 시스템 적합성 시험
시스템 적합성 시험 결과, 표적 피크가 잘 형성되었고, 이론 단수가 높으며, 인접 피크가 없어 모든 실험 요구 사항을 충족했습니다.
그림 1 Uridine 5'-Monophosphate 표준 작업 용액의 크로마토그램
표 3 Uridine 5'-Monophosphate 표준 작업 용액에 대한 시험 결과
| 화합물 | 유지 시간 (분) | 피크 면적 (mAU*s) | 피크 높이 | 테일링 팩터 | 이론 단수 |
| UMP | 5.559 | 322.525 | 55.643 | 1.130 | 23689 |
3.2 재현성 시험
Uridine 5'-Monophosphate (UMP) 표준 작업 용액을 6회 주입했습니다. 유지 시간의 상대 표준 편차(RSD)는 0.085%였고, 피크 면적의 상대 표준 편차는 0.191%였습니다. 두 값 모두 지정된 한계인 2.0% 미만으로, 실험 요구 사항을 충족함을 보여줍니다.
그림 2 Uridine 5'-Monophosphate (UMP) 재현성 시험의 크로마토그램
표 4 Uridine 5'-Monophosphate (UMP)에 대한 재현성 시험 결과
| 화합물 | 유지 시간(분) | 피크 면적(mAU*s) |
| Uridine 5'-Monophosphate | 5.559 | 322.525 |
| 5.559 | 323.013 | |
| 5.559 | 323.958 | |
| 5.561 | 322.753 | |
| 5.568 | 323.072 | |
| 5.569 | 322.141 | |
| RSD(%) | 0.085 | 0.191 |
3.3 시료 시험
5'-uridine monophosphate 표준 작업 용액(20mg/L)의 피크 면적은 322.525였고, 시험 시료 용액의 피크 면적은 274.211이었습니다. 외부 표준법에 따라 시료 내 UMP 함량은 17mg/L로 결정되었습니다.
그림 3 시험 시료의 크로마토그램
표 5 시료 시험 결과
| 화합물 | 유지 시간(분) | 피크 면적(mAU*s) | 피크 높이 | SNR | 이론 단수 |
| 5'-uridine monophosphate | 5.568 | 274.211 | 47.321 | 14710.024 | 24266 |
3.4 관련 물질에 대한 시스템 적합성 시험
관련 물질에 대한 시스템 적합성 용액 시험 결과, 모든 화합물 피크가 잘 형성되었고, 이론 단수가 높으며, 분해능이 2.0 이상으로, 실험 요구 사항을 충족했습니다.
그림 4 5'-uridine Monophosphate (UMP) 표준 작업 용액의 크로마토그램
표 6 5'-uridine Monophosphate (UMP) 표준 작업 용액에 대한 시험 결과
| 화합물 | 유지 시간(분) | 피크 면적(mAU*s) | 피크 높이 | 테일링 팩터 | 이론 단수 |
| 5'-uridine Monophosphate | 5.570 | 326.631 | 8.682 | 1.121 | 24708 |
| Uracil | 7.097 | 839.625 | 28.844 | 1.033 | 18284 |
| Uridine | 17.367 | 446.693 | n.a. | 0.995 | 19136 |
3.5 시료 재현성 시험
시스템 적합성 용액을 6회 연속 주입한 후, 5'-UMP, uracil, uridine의 유지 시간 재현성은 각각 0.031%, 0.058%, 0.102%였으며, 피크 면적 재현성은 각각 0.243%, 0.134%, 0.134%로, 실험 요구 사항을 충족했습니다.
그림 5 시료 재현성 시험의 크로마토그램
표 7 관련 물질의 유지 시간 재현성에 대한 시험 결과
| 화합물 | 5'-uridine Monophosphate | Uracil | Uridine |
| 유지 시간 (분) | 5.570 | 7.097 | 17.367 |
| 5.573 | 7.092 | 17.371 | |
| 5.571 | 7.089 | 17.360 | |
| 5.570 | 7.093 | 17.380 | |
| 5.570 | 7.091 | 17.363 | |
| 5.574 | 7.100 | 17.048 | |
| RSD (%) | 0.031 | 0.058 | 0.102 |
표 8 관련 물질의 피크 면적 재현성에 대한 시험 결과
| 화합물 | 5'-uridine Monophosphate | Uracil | Uridine |
| 피크 면적 | 326.631 | 839.625 | 446.693 |
| 326.175 | 841.410 | 447.261 | |
| 326.126 | 841.330 | 447.299 | |
| 327.412 | 842.394 | 448.319 | |
| 327.832 | 841.747 | 447.324 | |
| 327.850 | 842.911 | 448.083 | |
| RSD (%) | 0.243 | 0.134 | 0.134 |
3.6 관련 물질에 대한 감도 시험
관련 물질에 대한 감도 시험 용액에서 5'-UMP 주 피크의 신호 대 잡음비는 3보다 훨씬 커서 실험 요구 사항을 충족했습니다.
그림 6 관련 물질 감도 시험 용액의 크로마토그램
표 9 관련 물질 감도 용액의 시험 결과
| 화합물 | 유지 시간(분) | 피크 면적(mAU*s) | 피크 높이 | SNR | 이론 단수 |
| 5'-uridine Monophosphate | 5.573 | 26.797 | 4.638 | 949.156 | 24519 |
3.7 관련 물질 표준 및 시료 용액 시험
표준 용액(17 mg/L)의 피크 면적은 275.856이었습니다. 시험 용액에서 5'-uridine monophosphate를 제외한 불순물의 총 피크 면적은 38.021이었습니다. 외부 표준법에 의한 계산 결과, 시료 내 불순물 함량은 2.343mg/L입니다.
그림 7 관련 물질 표준 용액 시험의 크로마토그램
표 10 관련 물질 표준 용액의 시험 결과
| 화합물 | 유지 시간(분) | 피크 면적(mAU*s) | 피크 높이 | SNR | 이론 단수 |
| 5'-uridine Monophosphate | 5.572 | 275.856 | 47.414 | 14576.232 | 24512 |
그림 8 관련 물질 시료 용액 시험의 크로마토그램
표 11 관련 시료 용액에 대한 시험 결과
| 화합물 | 유지 시간 (분) | 피크 면적 (mAU*s) | 피크 높이 | SNR | 이론 단수 |
| 1 | 3.847 | 7.952 | 1.412 | 433.935 | 114734.178 |
| 2 | 4.178 | 4.358 | 0.710 | 218.248 | 11310 |
| 5'-uridine Monophosphate | 5.548 | 12576.642 | 1964.994 | 603778.520 | 196687.093 |
| Uracil | 7.093 | 218.727 | 26.939 | 8277.393 | 18342 |
| Uridine | 17.355 | 2810.366 | 145.230 | 44624.340 | 19058 |
4. 결론
본 실험에서는 "GB 1903.69-2024 국가 식품 안전 표준: 식품 영양 강화제 5'-Uridine Monophosphate"를 참조하여 자외선 검출기가 장착된 Wayeal LC3200 고성능 액체 크로마토그래피 시스템을 사용하여 분석을 수행했습니다. 실험 결과, 시스템 적합성 시험에서 모든 화합물의 피크 모양이 양호하고, 이론 단수가 높으며, 분해능이 2.0 이상으로, 실험 요구 사항을 충족했습니다. 5'-Uridine Monophosphate 표준 작업 용액 및 관련 물질의 유지 시간 재현성은 0.2% 미만이었고, 피크 면적 재현성은 0.3% 미만으로, 재현성이 우수했습니다. 관련 물질에 대한 감도 시험 용액은 5'-Uridine Monophosphate 주 피크의 신호 대 잡음비가 3보다 훨씬 커서 실험 요구 사항을 충족했습니다. 모든 시료 시험 결과는 정상적이었습니다. 위의 데이터는 표준 방법에 명시된 기기 요구 사항을 충족합니다.
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