2024-10-22
화장품에서 액체 염색법으로 6 메틸 쿠마린의 결정
1.1 기기 구성
표 1 액체 염색체의 구성 목록
| - 아니 | 모듈 | Qty |
| 1 | PB3210 바이너리 펌프 | 1 |
| 2 | CT3400 기둥 오븐 | 1 |
| 3 | AS3210 자동 샘플러 | 1 |
| 4 | UV3210 자외선 탐지기 | 1 |
| 5 | 노바크롬 SC18 4.6*250mm, 5μm | 1 |
| 6 | 스마트랩 워크스테이션 | 1 |
1.2 실험 방법
1.2.1 반응제
표 2 반응기 목록
| - 아니 | 재해소 | 순수성 |
| 1 | 메탄올 | 크로마토그래픽 등급 |
| 2 | 6-메틸쿠마린 | 99% |
| 3 | 아모늄 다이화수소포스фат | AR |
| 4 | 포스포르산 | GR |
1.2.1.1 6 메틸 쿠마린 표준 주식 용액 (1000mg/L): 적절한 양의 6 메틸 쿠마린 표준을 섭취합니다.메탄올로 용량을 녹여 고정하고 1000mg/L의 고농도 표준 원산물 용액으로 준비합니다..
1.2.1.2 6-메틸쿠마린 표준 작업 용액:6 메틸 쿠마린 표준 원산물 용액의 적절한 양을 피펫으로 넣고 메탄올로 희석하여 0의 농도를 가진 일련의 작업 곡선을 준비합니다.각각.1mg/L, 0.5mg/L, 1.0mg/L, 3.0mg/L, 5.0mg/L 및 10.0mg/L
1.2.1.3 나트륨 디히드로겐 포스파트 완충 용액: 나트륨 디히드로겐 포스파트 3.12g를 가져다가 물을 첨가하여 용해하고 1000mL까지 희석하고 인산의 pH를 3로 조절합니다.5.
1.2.2 염색체 촬영 조건
표 3 크로마토그래피 조건
| 크로마토그래피 열 | 노바크롬 SC18 4.6*250mm 5μm | ||
| 이동 단계 | A: 메탄올,B:나트륨 다이화수소포스фат 완충 용액 | ||
| 유동률 | 1mL/min | ||
| 기둥 온도 | 35°C | 파장 | 275nm |
| 주입 부피 | 10μL | ||
표 4 그라디언트 엘루션 프로그램
| 시간 (분) | 모바일 단계 A | 모바일 단계 B |
| 0 | 55 | 45 |
| 11 | 55 | 45 |
| 12 | 90 | 10 |
| 40 | 90 | 10 |
| 41 | 55 | 45 |
| 50 | 55 | 45 |
1.2.3 표본 전처리
샘플의 1g (정밀 0.001g) 를 10mL 용량 콜라에 넣고, 5mL의 메탄올을 첨가하고, 분출 용액과 샘플을 완전히 섞기 위해 소용돌이를 하고 흔들고, 20분 동안 초음파 추출,방온으로 냉각하고, 그 다음 메탄올로 10mL로 분량을 고정하고, 혼합하고, 그 다음 원심 분기 튜브로 옮기고, 5분 동안 5000r/min에서 원심 분기합니다.그리고 수퍼나넌트는 0을 통해 필터링됩니다.45μm 유기막, 그 다음 테스트합니다.
2실험 결과
2.1 시스템 적합성
그림 1 표준의 10mg/L 염색체
표 5 10mg/L 표준의 테스트 데이터
| 화합물 | 저장 시간 | 피크 지역 | 이론적 번호판 |
| 6-메틸쿠마린 | 11.168 | 574.285 | 15854 |
참고:염색체와 데이터는 6-메틸 쿠마린이 좋은 픽 모양을 가지고 있으며 목표 픽 주위에는 다른 픽이 없으며 이론적 판 번호는 높습니다.실험 요구 사항을 충족시키는.
2.2 표준 곡선
그림 2 표준 곡선의 시험 결과
참고: 크로마토그램은 6 메틸 쿠마린 곡선의 상관 계수의 R 값이 0보다 높다는 것을 보여줍니다.9999, 실험 요구 사항을 충족합니다.
2.3 반복 가능성
그림 3 반복성 염색체 3mg/L 표준 6개의 주입
표 6 3mg/ L의 반복성 데이터 6개의 주입의 표준 표 6 3mg/ L의 반복성 데이터 6개의 주입의 표준s
|
6-메틸쿠마린 |
- 아니 | 저장 시간 | 피크 지역 |
| 1 | 11.159 | 177.710 | |
| 2 | 11.161 | 176.711 | |
| 3 | 11.142 | 177.128 | |
| 4 | 11.152 | 176.985 | |
| 5 | 11.150 | 177.469 | |
| 6 | 11.149 | 177.629 | |
| RSD (%) | 0.061 | 0.222 |
참고: 위의 표의 데이터에 따르면, 6- 메틸 쿠마린의 보유 시간 반복성의 RSD는 0.061%이며, 피크 영역 반복성의 RSD는 0.222%입니다.반복성이 좋고 실험 요구 사항을 충족합니다..
2.4 감지 한계
그림 4 0.02mg/L 표준의 검사 염색체
표 7 0.02mg/L 표준의 테스트 데이터
| 화합물 | 저장 시간 | 피크 지역 | SNR |
| 6-메틸쿠마린 | 11.153 | 1.208 | 19.296 |
참고: 위의 데이터에 따르면, 신호와 소음 비율의 3배가 검출 한계로 계산되며, 6-메틸 쿠마린의 검출 한계는 0.004mg/L로 밝혀졌습니다.실험의 요구사항을 충족합니다..
2.5 화장품 샘플의 검사 결과
그림 5 화장품 샘플의 검사 염색체
참고: 화장품 샘플에서 6-메틸쿠마린이 검출되지 않았습니다.
2.6 주의
고속 원심분리기를 사용 할 때 튜브가 대칭적으로 배치되고 반대편의 튜브의 총 질량이 동일하도록 주의하십시오.
3결론
이 문서에서 소개된 분석 방법은, 6 메틸 쿠마린 검출에 대한 "화장품의 안전 및 기술 표준"을 참조하여,UV 탐지기와 함께 Wayeal LC3200 시리즈의 고성능 액체 염색체를 사용하여실험 결과는 6-메틸 쿠마린의 피크 형태가 시스템 적응성 테스트에서 좋으며 목표 피크 주변에는 다른 피크가 없다는 것을 보여줍니다.그리고 이론적인 판 번호는 높습니다., 실험 요구 사항을 충족. 곡선 상관 계수 R 값은 0 이상입니다.99996 메틸 쿠마린의 보유 시간 반복성의 RSD는 0.061%, 최고 영역 반복성의 RSD는 0.222%, 좋은 반복성을 나타냅니다. 6 메틸 쿠마린의 검출 한도는 0입니다..004mg/L. 위의 모든 시험 결과는 표준 방법의 기기의 요구 사항을 충족합니다.
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